便攜式顯微鏡在神經(jīng)膠質(zhì)瘤研究實驗中的應用 神經(jīng)膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)較為常見的原發(fā)性惡性腫瘤。髓樣分化蛋白 2 (MD2) 作為 toll 樣受體 4 (TLR4) 的輔助受體介導先天免疫反應。然而,MD2在調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤進展和免疫細胞浸潤中的實際作用仍不清楚。科學研究曾在探討 MD2 是否可以通過介導膠質(zhì)瘤中的免疫細胞浸潤成為獨立的預后因素。 實驗方法 便攜式顯微鏡采用高清攝影系統(tǒng)成像圖片,并支持在線多人同步在線同屏閱片。 實驗原理 使用CGGA、TCGA和Rembrandt數(shù)據(jù)庫進行MD2的mRNA表達和DNA甲基化差異分析,并使用Kaplan-Meier繪圖儀進行生存分析。應用單變量和多變量Cox回歸分析MD2的預后價值,并構(gòu)建列線圖評估MD2的臨床價值。然后,利用基因本體論(GO)和京都基因和基因組百科全書(KEGG)分析MD2相關(guān)的信號通路。此外,通過 TIMER 和 CIBERSOPT 計算 MD2 和免疫細胞浸潤之間的相關(guān)性。MD2 表達與巨噬細胞和中性粒細胞浸潤之間的相關(guān)性通過使用膠質(zhì)瘤細胞中的小干擾 RNA (siRNA) 敲低 MD2 表達來實驗驗證。
圖 1MD2 膠體表達來實驗驗證圖 結(jié)果分析(Result analysis): 研究發(fā)現(xiàn) MD2 過度表達并與膠質(zhì)瘤預后不良有關(guān)。同時,MD2的高表達可能是膠質(zhì)瘤中MD2基因DNA甲基化程度較低的結(jié)果。此外,單變量和多變量 Cox 回歸分析表明,MD2 可能是膠質(zhì)瘤的獨立預后因素。進一步的功能富集分析表明,MD2的功能與免疫反應密切相關(guān)。此外,MD2的表達水平與膠質(zhì)瘤中腫瘤相關(guān)巨噬細胞和腫瘤相關(guān)中性粒細胞的促腫瘤表型的浸潤和極化密切相關(guān)。 結(jié)論 (Result): 結(jié)論:這些發(fā)現(xiàn)提供了強有力的證據(jù),表明 MD2 可以作為一種有價值的免疫相關(guān)生物標志物來診斷和預測膠質(zhì)瘤的進展。 這些結(jié)果在CGGA數(shù)據(jù)庫和醫(yī)學機構(gòu)中得到驗證。實驗過程中,采集并制作組織樣本的免疫組化(IHC方法)切片,使用Ocus切片掃描顯微成像系統(tǒng)(芬蘭Grundium)進行數(shù)字化掃描和圖像保存及導出,而后并根據(jù)國際標準進行評估分級(圖2)
(圖 2) 膠質(zhì)瘤中 MD2 的表達和生存分析。CGGA (A) 、TCGA (B)和Rembrandt (C)數(shù)據(jù)庫中膠質(zhì)瘤患者MD2 的 mRNA表達差異分析。CGGA (D)、TCGA (E)和 Rembrandt (F) 數(shù)據(jù)庫中 MD2 表達與神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者總體存活率關(guān)聯(lián)的 Kaplan-Meier 存活圖。 組織染色切片進行數(shù)字化掃描 使用 Ocus切片掃描顯微成像系統(tǒng)(芬蘭Grundium)又對MYD88表達的組織染色切片進行數(shù)字化掃描和圖像保存及導出,根據(jù)標準進行評估分級。 圖 4 組織切片掃描顯微鏡掃描圖 文章結(jié)尾得出結(jié)論,MYD88對TIICs異常以及M2型巨噬細胞影響的神經(jīng)膠質(zhì)瘤患者,具有預后評估價值。 在這個實驗中使用的攜式數(shù)字病理掃描顯微鏡采用了智能云技術(shù),用戶可在任何有網(wǎng)絡的地方遠程控制和訪問其內(nèi)部的高清圖片,并支持多人實時同屏閱片。便攜式顯微鏡由于體積小巧,可裝入個人行李箱中,并支持移動充電;另外便攜式顯微鏡具備強大的內(nèi)嵌式電腦,不需外配服務器和電腦,可通過移動終端(手機、平板、筆記本電腦)的網(wǎng)頁瀏覽器在地球上任何有網(wǎng)絡的地方進行遠程數(shù)據(jù)訪問和高清圖片共享。 便攜式數(shù)字掃描顯微鏡的生物應用領(lǐng)域:
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